进动物房之前看完这些科普问答,秒变达人!

2019-07-31 14:40 by 南模生物


科研的路,是一条漫漫长路,需要不断地学习与探索。在这期间,经常会涉及一些动物实验,小鼠是最常使用的实验动物。那对于一只从未接触过小鼠的实验小白来说,有一些功课是必须要提前完成的。


接下来以一问一答的形式为大家介绍几点小鼠相关的基本知识,同时贴心的小编也已将这些知识点整理归类,印制在《小鼠饲养繁育科普知识》海报上,若想申领海报,可在文末免费获得。


常见近交系小鼠品系有哪些?我的实验应选择何种背景小鼠?

主要包括有C57BL/6 、BALB/c、FVB等

(1) C57BL/6?小鼠也叫Black 6 (B6)、C57 或C57 Black 6,是使用最为广泛的近交系小鼠。毛色为黑色,是目前基因工程小鼠模型、人类疾病小鼠模型、自发或诱导突变品系最常用的遗传背景。

(2) BALB/c 小鼠毛色为白色,被大家熟知主要是由于其在单克隆抗体与免疫学研究中的贡献。BALB/c小鼠对放射线极为敏感。乳腺癌发病率低,但随着年龄增长,患其他癌症(如肺癌和肾癌)的几率大为增加。

(3) FVB 小鼠毛色白色,起源于Swiss 小鼠。该小鼠受精卵有大而显著的原核,常用于显微注射,另外还具有繁殖能力强、产仔数多的特点。FVB 小鼠自发肿瘤率低,但化学诱导后易发鳞状细胞癌。


常见实验动物分为几级?

根据国务院批准的《实验动物管理条例》,按照相应的微生物控制标准,实验动物分为四级:一级,普通级动物;二级,清洁级动物;三级,无特定病原体级动物;四级,无菌级动物。

(1)?普通级动物 conventional (CV) animal:不携带所规定的人兽共患病病原和动物烈性传染病的病原。简称普通动物。?

(2)?清洁级动物 clean (CL) animal:除普通级动物应排除的病原外,不携带对动物危害大和对科学研究干扰大的病原。简称清洁动物。

(3)?无特定病原体级动物 specific pathogen free (SPF) animal:除清洁动物应排除的病原外,不携带主要潜在感染或条件致病和对科学实验干扰大的病原的实验动物。简称为SPF动物。

(4)?无菌级动物 germ free (GF) animal:动物体内、外无可检出的一切生命体的动物。简称为无菌动物。


小鼠编号标记的方法有哪些?

(1) 断趾编号法:断趾法是最常见的编号方法,根据对新生小鼠前肢 4 趾,后肢 5 趾的切断位置来进行编号。断趾时,应切断其 1 段趾骨,不能只断趾尖,防止伤口痊愈后辨别不清楚,此法常用于出生 7 天内的小鼠。

(2) 耳标法:用专门的耳孔机在小鼠耳朵上打孔或造成缺口,或者用剪刀在耳朵边缘剪出不同的缺口进行编号。打孔后必须用消毒过的滑石粉抹在打孔局部,以免伤口愈合过程中将耳孔闭合。

(3)?染色法:用毛笔或棉签蘸取化学药品,在实验动物体表不同部位涂上斑点,以示不同编号。常用染液有:3–5% 的苦味酸溶液(黄色);0.5% 的中性品红溶液(红色);2% 的硝酸银溶液(咖啡色)。


如何观察小鼠是否有疼痛?

动物实验的结果与实验动物的状态息息相关,如果实验动物的基本生活需求不能被满足,使它们生活在痛苦的应激状态下,那么它们在实验中就会有不正常的反应,研究人员得到的实验结果就不能保证准确可靠。

以下疼痛识别和止痛措施供参考:

图0-1.png


我的小鼠是否怀孕,多久生崽,是雄是雌呢?

性成熟周龄:6-8周

平均发情周期:4-5天;发情时间大约20h;分娩后20h开始发情

怀孕和断奶时间(品系依赖):怀孕19-21天;出生后20-21天断奶

性别判断:雄性小鼠生殖器与肛门之间的距离是雌性小鼠的2倍

小鼠检栓:阴道栓常视为交配成功的标志。雌鼠交配后10-12h,在阴道内会形成一个白色的阴道栓,这是受孕的标志。通常下午合笼,第二天早晨或上午检栓。(注意:见栓不等于怀孕,不见栓也不等于未怀孕)


基因工程小鼠拿到后,如何设计繁育策略,快速得到实验用鼠?

(1) 转基因小鼠?

转基因阳性小鼠与野生型小鼠交配:TG × WT

图1.jpg

(2)基因敲除/敲入?

杂合子与杂合子交配,获得纯合子:+/-?× +/- → -/-

对于ES细胞打靶途径获得的小鼠:

图2.jpg

对于CRISPR/Cas9途径获得的小鼠:


图3.jpg


(3)条件性基因敲除

获得 flox 纯合同时 Cre 阳性的小鼠:(f/+;Cre-)×(f/+;Cre+)→f/f;Cre+

图4.jpg


这样最终可以获得 1/8的 flox 纯合且带有 Cre 的条件性基因敲除小鼠(f/f;Cre+)。如果觉得效率过低,也可以在繁育 f/+;Cre+?的同时,繁育 flox 纯合子(f/f),再将这两种小鼠相互交配。这样,就可以获得 1/4 的 f/f;Cre+ 敲除小鼠啦。


图5.jpg


?

你是不是跟着小编在回答每个问题呢?有些问题看似简单,但想要完全掌握,还真得花点时间和精力。文章开头提到的《小鼠饲养繁育科普知识》海报,简短的文字配清晰的图片,通俗易懂,贴在动物房或实验室墙壁上,不经意间便轻松记忆。



看到这里,想必您已经对《小鼠饲养繁育科普知识》海报充满期待了吧,点击下载电子版海报吧!


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